Анализ кала на скрытую кровь

ПЦР в диагностике ВИЧ-инфекции

Для выявления ВИЧ-инфекции в условиях лаборатории используется серологическая диагностика — обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Затем следует подтверждение положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность данного подхода достигает 99% и более.

Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:

1. Неэффективность в период «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
2. Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
3. Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
4. Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).

Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. В «Методических рекомендациях о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» сказано: «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серологического окна», используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.

• Вирус иммунодефицита человека качественное определение ДНК провируса, ПЦР
• Вирус иммунодефицита человека количественное определение РНК, ПЦР
• Комплексная диагностика: качественное определение РНК вируса гепатита С/ ДНК вируса гепатита В/ РНК вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 типа

В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.

Правила сбора биоматериала

Для того чтобы получить достоверные результаты, необходимо правильно собрать биоматериал.

• После опорожнения мочевого пузыря проводится гигиеническое обмывание наружных половых органов и области анального отверстия с использованием нейтрального (без ароматизаторов) мыла;
• После дефекации кал собирается в специальный контейнер с крышкой. Необходимый для исследования объем биоматериала – 40 гр. Обязательное условие – образцы должны быть взяты из разных участков фекалий (3-4 точки);
• После сбора контейнер с калом отправляется в лабораторию на исследование. До момента отправки допускается хранение биоматериала в холодильнике при температуре 4-6С, но не более 8 часов.

Запомните! Сбор кала для исследования на скрытую кровь не проводят во время и спустя 3-5 дней после окончания менструации, а также в период обострения геморроя.

Другие исследования кала

• Копрограмма
• Кал на скрытую кровь
• Панкреатическая эластаза
• Углеводы в кале

Расшифровка результатов

При наличии многих показаний врач может назначить анализ кала на скрытую кровь. Нужна диета перед проведением данной процедуры. Это вопрос, который интересует очень многих пациентов. Учтите, соблюдение особого питания является очень важным условием для получения точных показателей, без которых нельзя будет назначить должное лечение. Вы уже знаете, что данный тип исследования проводится для того, чтобы определить присутствие кровяных клеток в каловых массах. В идеальном состоянии этого быть не должно. Однако, если они обнаружены, то это свидетельствует о наличии патологий пищеварительной системы.

Эритроциты в каловых массах могут находиться по нескольким причинам. Чаще всего такое случается при наличии повреждений желудка, кишечника или анального отверстия. Если у пациента наблюдается очень сильное кровотечение, то каловые массы приобретут очень темный цвет, практически черный. При малых же кровотечениях определить что-либо невооруженным глазом будет невозможно.

Не забывайте, даже если у вас начала кровоточить десна, то это уже приведет к неправильной расшифровке анализа. Поэтому готовиться к его проведению нужно очень тщательно. Вам придется на несколько дней забыть о чистке зубов для того чтобы не повредить десна, и не допустить попадание частичек крови в пищеварительную систему.

В нормальном состоянии у человека наблюдается в кале до двух миллиграммов гемоглобина на один грамм собранного материала. Если результат анализа положительный, это говорит о том, что в организме человека ест. скрытая кровь, поэтому нужно дополнительно выяснить какой же именно участок пищеварительной системы оказался поврежденным.

Расшифровка анализа может быть ложной, если пациент не слушал рекомендации врача, и не соблюдал диету, а также другие важные рекомендации. Неправильным может быть показатель в период месячных у женщин, а также при наличии глистов и некоторых заболеваний крови.

Только врач сможет правильно расшифровать результаты данного исследования, и при необходимости назначить вам еще одно.

ПЦР-диагностика гепатитов

Известно как минимум 5 вирусов, которые способны вызывать поражение печени — возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса. Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться.

Быстро и точно определить возбудителя – первоочередная задача врача. Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно. Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции – важный шаг в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.

• Вирус гепатита А, качественное определение
• Вирус гепатита В, количественное определение ДНК
• Вирус гепатита В, качественное определение генотипа
• Вирус гепатита С, качественное определение РНК
• Вирус гепатита С, количественное определение РНК
• Вирус гепатита D, качественное определение РНК

Анализ кала на яйца гельминтов и цисты простейших

Гельминты (глисты) — паразитические черви, обитающие в организме человека и животных и вызывающие заболевания, называемые гельминтозами (глистными инвазиями). Заболевание у человека чаще всего вызывают круглые (нематоды) и плоские черви (плятоды), которые делятся на ленточных червей – цестод и сосальщиков – трематод. Гельминты в процессе жизненного развития меняют хозяина, при этом круг хозяев, путей и механизмов передачи индивидуальны.

Клинические проявления в значительной степени определяются локализацией паразита, его численностью и особенностями питания. Гельминты, паразитируя в организме человека, могут оказывать механическое воздействие, повреждая ткани и органы хозяина, токсические и аллергические явления, нарушения обмена веществ, закрывать просвет кишок, выводных протоков печени, желчного пузыря, поджелудочной железы, нарушать перистальтику кишечника, раздражая рецепторы кишечной стенки.

Простейшие – одноклеточные организмы. Как и гельминты, в процессе развития простейшие проходят несколько стадий, меняют хозяев. Многие простейшие имеют две формы существования — вегетативную и цистную. Циста имеет прочную оболочку и обеспечивает выживание простейшего в неблагоприятных, и даже экстремальных, условиях. Именно цистами, как правило, заражается человек.

Анализ кала на яйца гельминтов и цисты простейших необходимо сдать при подозрении на паразитарное заражение, для контроля эффективности антипаразитарного лечения, перед госпитализацией, при оформлении медицинской книжки, справок. Например, детям перед посещением бассейна.

В лаборатории CMD анализ кала на яйца гельминтов и цисты простейших проводится по двум разным методикам:

• Кал на яйца гельминтов и цисты простейших: микроскопический метод; метод «толстого мазка» и окрашивание по Като
• Модифицированный метод седиментации с использованием концентраторов PARASEP (метод обогащения). Анализ кала на яйца гельминтов и цисты простейших с использованием концентратора Parasep: применение концентраторов PARASEP позволяют выявить гельминтов и простейших даже при небольшом их количестве.

В каких случаях может быть назначено проведение этого анализа

Анализ кала на скрытую кровь (подготовка и диета были описаны в этой статье) необходим для того, чтобы определить, присутствуют ли поражения желудочно-кишечного тракта. Если у пациента нарушена целостность хотя бы одного органа, то увидеть это будет несложно, просто оценив результаты исследования.

Итак, рассмотрим, в каких же случаях врачи назначают своим пациентам сдавать анализ кала на скрытую кровь:

• при наличии серьезных хронических заболеваний кишечника и желудка;
• при плохом аппетите и резкой потере веса;
• анализ может быть назначен, если пациент страдает частыми запорами или, наоборот, диареей;
• исследование может быть проведено при наличии изжоги, язв, полипов и колитов.

Также такой анализ будет сделан тем пациентам, у которых есть подозрения на наличие доброкачественных и злокачественных образований.

Фекальная кровь и желудочно-кишечные кровотечения

Фекальная кровь выделяется ежедневно в минимальных количествах, которые не обнаруживаются никакими тестами. Любое количество крови, превышающее физиологическую норму, должно вызывать беспокойство у врача и пациента. Наличие крови в кале может указывать на кровотечение, возникающее в одном из отделов пищеварительного тракта. 

• Кровь в стуле, видимая невооруженным глазом, может указывать на наличие кровоточащего геморроя, тогда стул покрыт свежей, ярко-красной кровью. Другие причины макроскопически заметной крови в кале: болезнь Крона, язвенный колит и колоректальный рак.
• Свежее ректальное кровотечение во время дефекации также может указывать на наличие инфекций, например, брюшного тифа, дизентерии, а также на нарушение свертываемости крови.
• Напротив, смолистые черные испражнения являются проявлением кровотечения из верхних отделов желудочно-кишечного тракта – пищевода, желудка или двенадцатиперстной кишки.

В фекалиях также может обнаруживаться так называемая оккультная кровь. Это кровь, незаметная для невооруженного глаза. Ее обнаружение на самой ранней стадии является ключом к ограничению тяжести заболевания, связанного с кровотечением.

Причины кала с кровью

Кал с кровью является симптомом целого ряда болезней кишечника и нижних отделов ЖКТ онкологического, воспалительного или инфекционного характера. Инициирующие факторы, вызывающие кровотечения, специалисты делят на несколько групп:

Латентный анализ скрытой крови – какие анализы показывают кровь в кале?

Какой анализ кала лучше? Наиболее часто выполняемый анализ фекальной оккультной крови – это тест на гваякол. Единичный анализ дает результат только у 30% пациентов, следовательно, требуется серия из трех тестов. 

В настоящее время существует три метода определения оккультной крови в фекалиях:

• Гвайакальные тесты. Используют свойства гемоцитов, присутствующих в образце, то есть обнаруживают компонент эритроцитов. Гваяколевая кислота, добавленная к тестируемому образцу, окрашивает его в синий цвет в результате реакции окисления.
• Иммунохимические тесты. Обнаружение белков, указывающих на наличие крови: альбумина, гемоглобина и глобина. Используются специфические антитела. Иммунные комплексы можно визуализировать различными способами.
• Порфириновая проба. Дает возможность количественной оценки гемоглобина в кале.

Образец иммунохимического теста

Гораздо более чувствительным является анализ кала на наличие оккультной крови иммунохимическим методом. Этот оккультный анализ крови менее подвержен влиянию питания, предшествующему анализу

Он обнаруживает только кровь из нижних отделов желудочно-кишечного тракта, что особенно важно в профилактике колоректального рака

Факты

§ исследование эластазы в кале более информативно, чем анализ химотрипсина

§ согласно последним рекомендациям лучше исследовать уровень эластазы 1 в соке 12-ти перстной кишки при стимуляционном тесте

§ анализ эластазы в кале – простой, доступный, экономически выгодный метод диагностики муковисцидоза

§ анализ можно использовать в качестве скринингового (массового) – для выявления патологии поджелудочной железы

§ определение эластазы 1 нецелесообразно после удаления части поджелудочной железы

Тест на скрытую кровь 

Тест «Colon View Hb и Hb/Hp» финского производителя «BioHit» — это визуальный иммунохроматографический экспресс-тест для качественного обнаружения гемоглобина человека (Hb) и гемоглобин-гаптоглобинового комплекса (Hb/Hp) в образцах кала. Тест был разработан для диагностики патологии нижних отделов желудочно-кишечного тракта, сопровождающейся кровотечениями, в частности такой, как колоректальный рак и большие кровоточащие аденомы (полипы). Предназначен для самодиагностики в домашних условиях.
Преимущества теста Colon View в сравнении с химическими тестами 
Для пациентов данный тест не требует соблюдения диеты, в отличие от химических тестов (реакция Грегерсена, азопирамовая проба)
Высокая чувствительность: 40 μг свободного гемоглобина или гемоглобин-гаптоглобинового комплекса на литр буферного раствора
Тест не дает перекрестной реакции с кровью крупного рогатого скота, коз, свиней, кроликов или домашней птицы. Также не дает перекрестных реакций с билирубином, витамином С и пероксидазой хрена)Иммунохимические тесты предлагают многие производители. Они бывают количественными (т.е. можно получить цифровое значение количества крови в стуле) и качественными (т.е. можно получить только результат «есть/нет»). Количественную оценку можно провести только в лаборатории, тесты для домашнего использования бывают только качественными, в том числе тест Colon View. Также существую тесты, определяющие только свободный гемоглобин и тесты, определяющие наличие гемоглобин-гаптоглобинового комплекса, Colon View относится к последним. 
Молекула гемоглобина (Hb) состоит из 2 пар пептидных (альфа- и бетаглобины) цепей и четырех групп гема, каждая из которых имеет один атом железа. При разрушении эритроцита эти молекулы достаточно быстро распадаются на альфа-бета молекулы, которые связываются белком плазмы – гаптоглобином (Hp), с образованием гемоглобин-гаптоглобиновых комплексов. Эти комплексы является относительно устойчивым к воздействию кислоты и протеолитической деградации и могут быть обнаружены даже после достаточно продолжительного пассажа через кишечник, поэтому возможность определять наличие Hb/Hp-комплексов существенно улучшает диагностику заболеваний правых отделов толстой кишки. 
Преимущества теста Colon View в сравнении с иммунохимическими тестами других производителей
Тест от известного финского производителя «BioHit»
Имеет достаточную доказательную базу эффективности в качестве скрининга колоректального рака
Простой, быстрый, одношаговый тест для домашнего применения
Удобный в использовании набор для сбора образцов
Определяет наличие в стуле гемоглобина и Hb/Hp-комплексов, что улучшает качество диагностики заболеваний правых отделов толстой кишки
Результат известен через 5-15 минут
Комплект поставки теста
Каждый комплект содержит один тестовый планшет, одну пробирку для сбора образца (Sample Collection Tube), один лист бумаги для сбора кала (Stool Collection Paper) и одну инструкцию по сбору образцов. Пробирки для сбора образцов содержат 2 мл 0,1М трис – HCl — буферного раствора с BSA (альбумин сыворотки крупного рогатого скота) и 0,02% азидом натрия. 
Условия хранения теста
Тестовые планшеты и комплекты для сбора образцов могут храниться при температуре от +2° до +30°C до истечения срока годности.

Ложные результаты

Несоблюдение правил подготовки перед сдачей кала может стать причиной получения ошибочных результатов. Они могут быть как ложноположительными, так и ложноотрицательными.

Основная причина ложноположительных тестов, указывающих на наличие внутреннего кровотечения, – неправильно проведенная подготовка

Ложноположительные результаты встречаются достаточно часто. Причиной становится пренебрежительное отношение человека к подготовительному этапу. В таком случае тест показывает высокое содержание гемоглобина при отсутствии внутреннего кровотечения. Исказить конечные результаты может всего одно яблоко, съеденное за сутки до сдачи биологического материала.

Правильно проведенная подготовка к исследованию кала на скрытую кровь во многих случаях позволяет избежать весьма неприятной процедуры колоноскопии. Методика представляет собой осмотр кишечника путем введения оборудования через анальное отверстие.

Подготовка к сдаче анализа по Грегерсену

Чтобы получить максимально достоверные результаты, к сдаче кала необходимо правильно подготовиться. Рекомендации будет следующими:

1. За неделю до планируемой сдачи необходимо прекратить прием таких препаратов, как слабительные, висмут- и железосодержащие, противовоспалительные нестероидные средства. Запрещено использовать ацетилсалициловую кислоту и содержащие ее в своем составе медикаменты.
2. Необходимо отказаться от введения ректальных суппозиториев.
3. Запрещено клизмирование.
4. Перед анализом кала на скрытую кровь – за двое суток до сдачи – нужно исключить любые инструментальные тесты ЖКТ. В ходе исследования слизистая может быть случайным образом повреждена. Выделяющаяся кровь может спровоцировать ложноположительные результаты.
5. За несколько дней до забора экскрементов нужно отказаться от чистки зубов. Даже небольшой объем крови, выделившейся при повреждении десен, может попасть в желудок. И этот гемоглобин также способен негативно влиять на конечный результат.

Перед выполнением анализа пациенту будет рекомендовано соблюдение специальной диеты. Ее длительность – 72 часа.

Основной пункт подготовки к сдаче анализ – строгое соблюдение диеты

Питание пациента должно полностью исключать продукты с высоким содержанием железа. Сбору кала должен предшествовать отказа:

• от яблок;
• огурцов;
• белой фасоли;
• шпината;
• хрена;
• цветной капусты;
• мясных и рыбных блюд;
• субпродуктов;
• овощей зеленого цвета.

В идеале, чтобы не ошибиться с меню, медики рекомендуют в дни подготовки к сдаче кала придерживаться молочной диеты. В состав рациона также могут входить:

• картофель;
• хлеб;
• каши (исключение – гречка, овсянка, ячка, чечевица, горох).

Несоблюдение рекомендаций приведет к ошибке и повторному взятию кала на исследование либо назначению более серьезных анализов.

Диета на молочной основе

Доктора говорят о том, что подготовительная система питания будет иметь смысл, если сделать молочные продукты основой рациона. Так вам не придется сдавать повторно кал на скрытую кровь. Перед диетой, конечно, нужно себя настроить. Сам рацион питания базируется на применении большого количества нежирных молочных продуктов. Сюда можно отнести творог, кефир и молоко. Однако в небольшом количестве в меню все же должны присутствовать овощи и фрукты.

На основе молока вы можете готовить каши, а из творога делать запеканки. При этом разрешается добавлять в них небольшое количества сахара или меда. Конечно, кроме молока вы можете пить воду, различные компоты и кисель.

Перечень обследований и документов, необходимых для госпитализации детей:

Условия совместного нахождения в стационаре родителя (законного представителя) с пациентами детского возраста регламентируется законодательством Российской Федерации.

Подготовка к анализу

Иммунохимический метод исключает диету, поэтому кушать можно все. Но за 14 дней отказаться от:

• любых препаратов слабительного действия;
• лекарств типа Аспирина или Ибупрофена, влияющих на показатели свертываемости крови и вызывающие кровотечения;
• инструментальных методов диагностики типа колоноскопии или ирригоскопии, которые могут изменить слизистые оболочки кишечника. Сюда же следует отнести клизмы и ректальные свечи.

Реакция Грегерсена требует более тщательной подготовки. В противном случае можно получить ложноположительный результат, так как реагенты чувствительны к гемоглобину животных, некоторым витаминам и другим веществам, содержащимся в продуктах питания.

Многих пациентов интересует вопрос, сколько надо готовиться к этой процедуре и как это делать.

Подготовка к исследованию начинается за 3-4 дня и включает:

• диету;
• полный отказ от медикаментозных препаратов, в составе которых есть висмут, железосодержащие компоненты, аскорбинка, ацетилсалициловая кислота и барий;
• перенос инструментальной диагностики кишечника на несколько дней после сдачи анализа. Проводить колоноскопию или рентген накануне запрещено;
• исключение ректальных свечей и клизм;
• отказ от чистки зубов и посещения стоматолога, так как кровь при кровоточивости десен в период лечения может попасть в ЖКТ и дать ложный результат.

Обратите внимание!Женщинам во время менструального цикла проводить анализ кала на скрытую кровь запрещается.

Запрещенные продукты

Что нельзя есть и следует исключить из рациона за 4 суток до сдачи анализа:

• мясные и субпродукты, в том числе печень;
• рыбные блюда;
• колбасы, ветчину;
• яблоки в любом виде, особенно зеленого цвета;
• сливы, бананы, ананасы;
• из овощей – помидоры, морковь, свеклу, болгарский перец, огурцы, капусту любых сортов, кабачки;
• блюда из продуктов, содержащих большое количество железа, а также чернику, гранат, белую фасоль.
• паприку, любую свежую зелень, хрен, орехи.

Что можно есть:

• яйца в любом виде;
• каши;
• картофель;
• хлебобулочные изделия;
• масло, в том числе сливочное;
• фрукты, но не слишком много;
• молочные и кисломолочные продукты.

Выводы

Использование уровня эластазы в кале как маркера
функциональное активности имеет и положительные и отрицательные стороны.

Положительные факторы
метода:

• Высокая достоверность корреляции содержания
  маркера в кале при умеренной и тяжёлой секреторной недостаточности поджелудочной
  железы
• Высокая специфичность по отношению к экзокринной
  функции секреторных панкреацитов
• Доказанная корреляция с результатами
  секретин-панкреозиминового теста
• Простои и неинвазивный метод
• Маркер интактен в отношении других протеиназ
• Метод малочувствителен к сопутствующей
  медикаментозной терапии
• Стабильные показатели концентрации в кале в
  течении длительного периода
• «Не проблемный» в аспекте хранения и
  транспортировки материал для исследования (кал)
• Основной способ дифференциальной диагностики при
  болезни Крона и муковисцидозе

Отрицательные факторы
метода

• Необходимость лиофилизации субстрата(кала) для
  предотвращения «разведения»
• Сложность дифференциальной диагностики первичной
  и вторичной секреторной недостаточности поджелудочной железы
• Относительно низкая репрезентативность при малой
  активности патологического процесса (часто маркер находится в пределах нормы)
• Высокая стоимость диагностического метода
• Низкая селективность в отношении ферментативных
  фракций. Оценивает только общую секреторную активность

Широкое применение такого метода имеет смысл при оценке в
динамике экзокринной функции поджелудочной железы, использовании маркера при
невозможности проведения секретин-панкреозиминового теста, оценки эффективности
проведённого лечения, дифференциальной диагностики таких заболеваний как
болезнь Крона, детский муковисцидоз, онкологическая патология. Учитывая большое
количество факторов, способных оказывать влияние на достоверность конечных
данных, относительно высокую стоимость лабораторного исследования, низкая
достоверность при незначительных изменениях экзокринной функции не всегда
позволяет надеяться только на один диагностический критерий.

Тест на панкреоэластазу обладает определенным
диагностическим значение, но в совокупности с показателями амилазы крови,
копрограммой, общим анализом крови результативность диагностики ощутимо
возрастает.