При обследовании у вас впервые обнаружили маркеры вирусных гепатитов. что делать?

Вирус Эпштейи-Барр (ВЭБ)

Вирус Эпштейи-Барр (ВЭБ) — повсеместно распространенный вирус, инфицирующий В-лимфоциты и вызывающий латентную инфекцию. Синдром, вызываемый ВЭБ, включает инфекционный мононуклеоз, а также опухоли типа карциномы, В клеточной лимфомы. 90-95 % — случаев инфекционного мононуклеоза связано с вирусом Эпштейн-Барр. Для заболевания характерна триада признаков: жар, боль в горле и лимфоаденопатия. Так как сходные симптомы имеют многие заболевания, лабораторное подтверждение при диагностике инфекционного мононуклеоза имеет решающее значение.

Серологическая диагностика инфекции вирусом Эпштейн-Барр основана на определении специфических антител к нескольким антигенам, однако, не существует единого надежного теста, который бы позволял получать достоверную информацию для постановки окончательного диагноза. На ранних стадиях развития инфекции в образцах сыворотки крови пациента обнаруживаются IgM и IgG к нуклеарному антигену (VCA) (IgM-VCA e IgG-VCA). Активная фаза инфекционного мононуклеоза также характеризуется продукцией низкоавидных антител IgG к VCA, и в большинстве случаев, наличием IgG, специфичных к комплексу ранних антигенов. IgM антитела к нуклеарному антигену могут служить индикатором острой инфекции, однако ряд авторов отмечает частое возникновение ложноположительных реакций вследствие неспецифической реактивности.

Появление IgG анти VCA антител может происходить с опозданием, или вообще не происходить. С другой стороны, IgM антитела к антигену VCA могут выявляться в течение нескольких месяцев после первичного инфицирования, повторно появляться при реактивации инфекции, а также при мононуклеозах иной этиологии — ЦМВ, токсоплазмоз, гепатит А, ВИЧ. Ранние вирусспецифические IgG антитела, образующиеся при первичном инфицировании обладают низкой авидностью, которая возрастает в течение нескольких недель или месяцев. Эффективность определения авидности IgG к VCA антигену вируса Эпштейн-Барр была показана в исследованиях ряда авторов. Дополнительное использование измерения авидности повышает чувствительность тестов на анти — VCA IgG и IgМ с 93% до 100%.

Заражение вирусом простого герпеса (ВПГ) ведет к пожизненной персистенции с возможностью реактивации вируса и перекрестного заражения другим серотипом ВПГ. Преобладание хронических и бессимптомных форм течения болезни, а также возможность атипичных проявлений ставит под сомнение диагностику по внешним признакам. Приблизительно 20 % больных ВПГ — 2 не имеют симптомов вообще, а 60 % лиц имеют признаки, которые невозможно диагностировать и которые не принимаются врачом и самими больными за герпес (нетипичные проявления). Обе эти группы имеют риск заразить своих партнеров. Специфические IgM k ВПГ могут образовываться как при первичном инфицировании, так и при реинфекции и реактивации вируса, но в то же время они способны вырабатываться в достаточном для диагностики количестве только у 30% людей. Единственным способом, позволяющим сразу и достоверно диагносцировать первичную инфекцию, является определение индекса авидности специфических антител.

Таким образом, при первичной инфекции IgG имеют низкую авидность. С течением времени, после перенесенной инфекции или в случае обострения инфекции, авидность антител повышается. Определение авидности может использоваться для выявления первичной инфекции при отсутствии или низких количествах IgM, а также для диагностики перенесенной инфекции с длительным персистированием IgМ. Тест на авидность прост в исполнении, доступен для большинства иммунологических лабораторий и в ряде стран является рутинной диагностической процедурой. Использование теста на авидность специфических IgG при краснухе, цитомегаловирусной инфекции, токсоплазмозе, инфекций вирусами Эпштейн-Барр, простого герпеса, гепатита С, совместно с традиционными серологическими методами, дает возможность установления момента первичного инфицирования с использованием одного образца сыворотки.

Что делать, если уровень ПСА повышен?

При повышении уровня ПСА необходимо выполнить биопсию предстательной железы. Симптомы различных заболеваний предстательной железы, которые могут сопровождаться повышением ПСА, очень похожи. Ими могут быть учащённое затруднённое мочеиспускание, вялая струя мочи, необходимость мочиться несколько раз за ночь, ощущение неполного опорожнения мочевого пузыря, сильные позывы к мочеиспусканию и т.д.

Пальцевое ректальное исследование, дополненное ультразвуковым исследованием, не может обеспечить своевременную диагностику рака простаты, особенно в случае начальных стадий заболевания без экстракапсулярного поражения. Даже компьютерная или магнитно-резонансная томографияпредстательной железы при небольшом увеличении ПСА не позволяют провести дифференциальный диагноз между доброкачественной и злокачественной опухолью простаты. Именно поэтому роль биопсии простаты в ранней диагностике рака предстательной железы исключительно важна.

Как определяется уровень ПСА?

Определение уровня простат-специфического антигена проводится путем взятия анализа крови из вены. В зависимости от методики определения ПСА в каждой конкретной лаборатории и ряда других факторов результат становится известен в различные сроки – от 8 часов до нескольких дней.

Чтобы исключить возможность ложноположительных результатов, взятие крови на исследование следует проводить не ранее 5 суток после таких манипуляций, как пальцевое ректальное исследование, массаж простаты, трансректальное ультразвуковое исследование (когда датчик вводится в прямую кишку) и после любых других механических воздействий на предстательную железу (клизма, тепловые процедуры и т.п.). Рекомендуется также избегать эякуляции за 2–3 дня до исследования, езды на велосипеде или на лошади, а также употребления алкоголя.

Гепатит В: носительство или болезнь, приводящая к циррозу и раку ?

В гепатологии, занимающейся изучением и разработкой новых методов лечения заболеваний печени, за прошедшие два десятилетия произошел невероятный прогресс. Разработаны и внедрены методы точной вирусологической оценки активности в организме человека вирусов гепатита «С» и «В», которые являются наиболее частыми причинами хронического гепатита, цирроза, а также рака печени. Разработаны и широко применяются методы так называемой «неинвазивной», то есть без применения биопсии печени, диагностики степени поражения печени, установления стадии цирроза. Еще более впечатляющий прогресс достигнут в лечении этих заболеваний. Проблему гепатита «С» мы неоднократно обсуждали. Стоит только добавить, что открывается новая эпоха в лечении гепатита «С» – разработаны и уже начинают применяться препараты с прямым противовирусным действием, благодаря которым, как полагают, в течение десятилетия удастся достичь стопроцентной эффективности лечения. В этой статье мы расскажем о гепатите «В» и новых успехах в его лечении.

Вирус гепатита «В» в 100 раз заразнее ВИЧ (вируса иммунодефицита человека).

Несмотря на широкое внедрение вакцинации против гепатита «В», распространенность заболевания остается высокой. В разных регионах России распространенность носительства вируса составляет от 1,5% до 11,5%. Как и при гепатите «C», источником заражения является кровь инфицированного человека. Пути инфицирования аналогичны: использование нестерильных игл, инструментов при различных медицинских и немедицинских (пирсинг, татуировки, маникюр/педикюр) манипуляциях, использование в быту предметов личной гигиены инфицированного человека (бритва, ножницы, зубная щетка и др.) незащищенные половые контакты, передача вируса от инфицированной матери ребенку. Вирус гепатита «В» более устойчив во внешней среде и заразнее вирусов гепатита «С» и иммунодефицита человека. Поэтому естественные пути передачи вируса «В» (половой путь и передача от матери ребенку) для этого вируса более значимы.

Как коронавирус влияет на сон

Российские сомнологи отмечают, что во время пандемии до 45% возросло количество пациентов с жалобами на бессонницу и нарушение сна. У этого явления несколько причин:

• тревога и стресс;
• апноэ и проблемы с дыханием;
• симптоматическое течение коронавируса (больного беспокоит лихорадка, кашель и др.);
• цитокиновый шторм;
• влияние противовирусных медикаментов;
• истощение нервной системы;
• эндокринные сбои (нехватка) витаминов и минералов — «строительного материала» для клеток и гормонов;
• гиподинамия (малоподвижный образ жизни).

Чтобы восстановить здоровый сон, необходимо первично выявить причину его нарушения. Одним пациентам рекомендована психотерапия, другим необходимы медикаменты и специальные препараты (снотворное, мелатонин, витаминные комплексы с магнием, витамины B12, D), а третьим — комплексное решение проблем со здоровьем (восстановление легких, дыхания, нормализация жизненных показателей). При легком нарушении сна помогут фитопрепараты и ванны с магнием перед сном.

Для точной постановки диагноза есть определенный алгоритм обследования

При слабоположительных или сомнительных HBsAg, HBcoreAb, HCVAb суммарные, — необходимо провести экспертную оценку данных результатов в референс-лаборатории. При подтверждении результатов назначаются обследования на:

• HBsAb, HBeAb, HBeAg, HDVAb,
• определение антител к основным белкам гепатита С методом иммунного блоттинга,
• качественные ПЦР для выявление генетического материала гепатитов В и/или С в крови,
• клинические и биохимические анализы крови,
• ультразвуковое исследование органов брюшной полости.

При выявлении положительных результатов качественной ПЦР рекомендовано определение:

• «вирусной нагрузки» (количества копий вируса в крови),
• генотипа вируса гепатита С,
• степени фиброза печени с помощью ультразвукового метода (фиброскан), биохимических показателей (фибротест, фибромакс), пункционной или лапароскопической биопсии печени.

По результатам данных исследований решается вопрос о дальнейшей тактике ведения пациента. При хроническом вирусном гепатите с минимальной или низкой активностью назначают только диспансерно-динамического наблюдения с соблюдением диеты № 5, режима труда и отдыха, контрольными осмотрами и лабораторными исследованиями 1 раз в 6 месяцев. При умеренной вирусной и биохимической активности назначают гепатопротекторной терапии, а при высокой – решение вопроса о назначении противовирусной терапии.

Более подробно о вариантах лечения вирусных гепатитов и методах контроля эффективности терапии, читайте здесь.

Группы риска

HBV передается в основном через контакт с зараженной кровью или выделениями организма. У инфицированных лиц вирус может находиться в крови, сперме, выделениях из влагалища, грудном молоке и слюне.

К группе риска относятся:

• супруги, сексуальные партнеры и члены семьи лиц, инфицированных HBV
• лица, употребляющие внутривенные наркотики
• гомосексуалисты
• лица, ведущие беспорядочную половую жизнь
• переселенцы из мест с высокой заболеваемостью
• медицинские работники (особенно — хирурги, патологоанатомы, врачи гемодиализа, врачи онкологических отделений, стоматологи, сотрудники лабораторий, контактирующих с сывороткой крови)
• люди с почечной недостаточностью, находящиеся на гемодиализе
• люди, которым часто переливают кровь (например, больные гемофилией, талассемией)
• работники Службы спасения

Скорость передачи гепатита В от матери к новорожденному очень высока, и почти у всех инфицированных детей развивается хронический гепатит В. К счастью, перинатальную передачу можно значительно снизить с помощью вакцинации.

Редко гепатит В может передаваться через переливание компонентов крови, от доноров печени и других органов. Тем не менее, кровь и донорские органы тщательно обследуют на наличие вирусов гепатитов.

Лечение гепатита В и С в нашем центре

Обращаясь в наш Центр гепатологии и вирусных инфекций, Вы получаете:

• Консультации ведущих специалистов по Северо-Западу, врачей высшей квалификационной категории, кандидатов медицинских наук, имеющих внушительный стаж лечения гепатологических пациентов (в том числе пациентов с острыми и хроническими вирусными гепатитами С современными противовирусными препаратами) от 10 до 45 лет;
• согласно мировым стандартам (EASL, AASLD, AGA);
• Курс лечения, индивидуально подобранный по результатам обследования;
• Постоянное наблюдение врачей-специалистов;
• Аппаратный плазмаферез в случае выраженной интоксикации;
• Индивидуально подобранный курс лечения современными препаратами в соответствии с российскими и мировыми стандартами;
• Постоянное наблюдение в динамике;
• Физиотерапевтические процедуры;
• Инфузионную терапию в условиях дневного стационара;
• При необходимости есть возможность госпитализации в ведущие стационары города;
• Абсолютную конфиденциальность.

Что важно знать о формах инфекции вируса гепатита «В»?

Хроническая инфекция может протекать в виде двух основных форм:

Первая форма – неактивное носительство HBsAg. Она характеризуется отсутствием вирусных частиц в сыворотке крови или выявлением их в низком титре, отсутствием воспаления в печени и, как правило, не прогрессирующим течением. При снижении иммунитета неактивное носительство HBsAg может перейти в активную форму гепатита «В». 

Вторая форма — хронический активный гепатит В. Она характеризуется наличием большого количества вирусных частиц в крови, наличием воспаления в печени, что отражается в изменении так называемых печеночных проб (или ферментов), прогрессирующим течением с риском развития цирроза и рака печени. В последние годы установлено, что чем выше концентрация вируса в крови, или «вирусная нагрузка», тем выше риск развития цирроза  и рака печени.

Различить эти две формы на основании самочувствия больного, только клинических признаков болезни (которые, как и при неактивном носительстве, могут полностью отсутствовать у больного хроническим гепатитом В) невозможно.

Исследуемый материал

Венозная кровь

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т. д.

Референтные значения: отрицательно

Тест на HВsAg в крови может назначаться как отдельно, так и в сочетании с другими анализами на гепатит В. Их результаты обычно оцениваются вместе. Иногда расшифровка анализа на HВsAg зависит от показателей смежных анализов на гепатит В.

Сроки выполнения некоторых лабораторных исследований в КОГБУЗ «Инфекционная клиническая больница»*

Сроки разработаны без учета дня забора крови.

Дни недели, указанные в таблице, отражают непосредственно дни проведения исследования (для того, чтобы биологический материал был исследован именно в этот день/дни, сдавать его нужно накануне).  
График постановок ориентировочный и может быть скорректирован в соответствии с конкретной эпидситуацией. Результаты исследований в регистратуре Центра СПИД выдаются после 17.00.

Группа крови системы Резус:

Антигены системы резус встречаются со следующей частотой: Д – 85 %; С – 70 %; с – 80 %; Е – 30 %; е – 97,5 %. Антигены системы резус обладают способностью вызывать образование иммунных антител. Наиболее активным в этом отношении является антиген Д, который и подразумевается под термином «резус – фактор». Именно по наличию или отсутствию антигена Д все люди делятся на резус – положительных и резус – отрицательных..

Иммуногенность других антигенов системы резус существенно ниже и убывает в следующем ряду: с > Е > C > е. Обладая выраженными иммуногенными свойствами, антиген D в 95 % случаев является причиной гемолитической болезни новорожденных при несовместимости матери и плода, а также частой причиной посттрансфузионных осложнений.

Доноры, на эритроцитах которых отсутствует антиген Д, но присутствует один из антигенов С или Е, считаются резус – положительными.

В системе резус встречаются случаи отсутствия на эритроцитах какого-либо из антигенов и очень редко – полное отсутствие всех антигенов системы резус (фенотип Rh – ноль).

Что такое простат-специфический антиген?

Простат-специфический антиген (или сокращённо – ПСА) представляет собой белковое вещество, вырабатываемое клетками предстательной железы

ПСА является наиболее ценным опухолевым маркёром, исследование которого в сыворотке крови необходимо для диагностики и наблюдения за течением доброкачественной гиперплазии и рака предстательной железы.Поскольку в настоящее время рак простаты занимает второе место среди причин смерти мужчин от злокачественных новообразований и встречается после 60 лет у каждого шестого мужчины, исключительно важно выявить заболевание на ранней стадии, когда эффективность лечения выше. Установлено, что при раке простаты уровень ПСА в сыворотке крови может значительно повышаться

В то же время, повышение уровня простат-специфического антигена в крови не всегда свидетельствует о наличии злокачественного процесса.

Причинами повышения ПСА помимо рака простаты также могут быть:

• Наличие воспаления или инфекции в простате.
• Доброкачественная гиперплазия простаты (также называемая аденомой простаты).
• Ишемия или инфаркт простаты.
• Эякуляция накануне исследования.

Текст подготовил

Котов Максим Анатольевич, главный врач центра КТ «Ами», кандидат медицинских наук, доцент. Стаж 19 лет

Список источников

1. Котов М.А. Опыт применения компьютерной томографии в диагностике заболеваний органов дыхания у детей / Материалы X Невского радиологического Форума (НРФ-2018). – СПб., 2018, Лучевая диагностика и терапия. 2018. № 1 (9). — С. 149.
2. Панов А.А. Пневмония: классификация, этиология, клиника, диагностика, лечение, 2020.
3. Бова А.А. Пневмонии: этиология, патогенез, клиника, диагностика, 2016.
4. Chl Hong, M.M Aung , K. Kanagasabai , C.A. Lim , S. Liang , K.S Tan. The association between oral health status and respiratory pathogen colonization with pneumonia risk in institutionalized adults, 2018.
5. Yang-Pei Chang, Chih-Jen Yang, Kai-Fang Hu, A-Ching Chao, Yu-Han Chang, Kun-Pin Hsieh, Jui-Hsiu Tsai, Pei-Shan Ho, Shen-Yang Lim. Risk factors for pneumonia among patients with Parkinson’s disease: a Taiwan nationwide population-based study, 2016.
6. Клинические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике тяжелой внебольничной пневмонии у взрослых. Министерство здравоохранения РФ, 2019.

ХРОНИЧЕСКИЙ ГЕПАТИТ В

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, заключающийся в выявлении специфических (индивидуальных для каждого микроорганизма, вируса) антител.

Антитела (иммуноглобулины, Ig) — специфические белки-защитники, вырабатываемые лейкоцитами (белыми кровяными тельцами) в ответ на появление в организме чужеродного генетического материала (вирусов, бактерий, простейших).

Иными словами, результат иммуноферментного анализа (ИФА) показывает не факт наличия инфекционного агента (инфекции) в организме, а состояние иммунитета к этому инфекционному агенту. 

Таким образом, на основании результатов исследования крови методом ИФА можно лишь опосредованно (косвенно) судить о наличии /отсутствии инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) по ответной реакции на него иммунной (защитной) системы организма.

В зависимости от срока давности существования в организме человека вирусов, бактерий, простейших вырабатываются антитела классов А, M, G (IgА, IgM, IgG).

Антитела классов А, M, G свидетельствуют о свежем, недавнем или давно существующем заражении соответственно.

По комбинации количественных показателей антител данных классов можно судить об обострении или снижении активности хронического инфекционного процесса, или повторном заражении.

Данная информация представляет в гинекологии и дерматовенерологии известную ценность, позволяя ответить на вопрос «кто кого заразил?» и подобрать лечение в зависимости от длительности инфекционного процесса.

Исследование крови методом ИФА в гинекологии широко используют для диагностики микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомоноза, гарднереллеза, гонореи, TORCH-инфекций (токсоплазмы, краснухи, цитомегаловирусной инфекции и герпеса).

В случае низкой иммуногенности инфекционного агента (инфекции) либо недостаточной активности иммунной системы выработка антител (иммуноглобулинов классов А, M, G) может отсутствовать или быть диагностически незначимой при фактическом (реальном) наличии инфекционного агента (инфекции) в организме по данным полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Слабой иммуногенностью (способностью существовать незаметно для иммунной системы) обладают , , .

Результаты иммуноферментного анализа (ИФА) в ряде случаев могут быть ложноположительными, т.е. при фактическом отсутствии инфекционного агента (инфекции) в организме иммуноферментный анализ (ИФА) определяет наличие антител к нему.

Высокая частота ложноположительных реакций часто отмечается при диагностике методом ИФА .

Низкой иммуногенностью инфекционного агента (бактерий, вирусов, простейших) и индивидуальными особенностями иммунитета человека объясняется кажущееся противоречие результатов ИФА и ПЦР, при котором исследование методом ИФА не находит инфекцию, а метод ПЦР свидетельствует о наличии инфекции в организме.

Таким образом, диагностика инфекционных заболеваний, включая инфекции, передаваемые половым путем (анализ на скрытые инфекции), требует комплексной (совокупной) оценки результатов нескольких диагностических методов.

Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявить специфические белки, возникающие в организме человека при наличии онкологического процесса — так называемые онкомаркеры.

• ИФА инфекции стоимость
• ИФА онкомаркеры стоимость
• ПЦР стоимость
• Стоимость приема гинеколога с целью «Провериться на ВСЁ»
• Стоимость приема уролога с целью «Провериться на ВСЁ»

Диагностика вирусов и бактерий картофеля методом ИФА

Иммуноферментный анализ (ИФА, англ. enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) – лабораторный метод качественного и количественного определения разнообразных молекул, вирусов, бактерий и т.п. В основе метода лежит высокоспецифичная иммунологическая реакция антитела и антигена.

Антителами являются сложные белковые молекулы (иммуноглобулины), синтезируемые клетками иммунной системы человека и прочих теплокровных животных в ответ на проникновение в организм антигенов – вирусов, бактерий, молекул и прочих чужеродных объектов. Высокая специфичность взаимодействия между антителом и антигеном обусловлена тем, что активный центр антитела способен связываться с уникальным фрагментом антигена.  Именно это свойство реакции антитело-антиген определяет специфичность, надёжность, достоверность и чувствительность ИФА при проведении диагностики патогенов картофеля. При наличии целевого патогена в исследуемом образце формируется комплекс соответствующих антител и антигена, детекцию которого определяют по активности фермента, связанного с антителами.

Существует широкое разнообразие методов  проведения ИФА, различающихся природой антигена, принципом связывания, условиями проведения, способами детекции результатов ферментативной реакции и т.п. Для диагностики патогенов сельскохозяйственных культур традиционно используется “сэндвич”-метод с использованием двух типов антител (DAS-ELISA – double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay). В качестве фермента, обычно, используется щелочная фосфатаза.

Проведение иммуноферментного анализа

Реакция проводится в 96-луночных полистирольных микропланшетах, характеризующихся высокой эффективностью связывания белковых молекул, в т.ч. иммуноглобулинов (антител), на своей поверхности.

На первом этапе антитела захвата (capture antobodies) разводят в необходимой концентрации в покровном буфере (coating buffer), вносят в лунки микропланшетов и инкубируют от нескольких часов при температуре +30-37°С до нескольких дней при температуре +4°С. Во время инкубирования антитела неспецифически адсорбируются на поверхности лунок микропланшета. По окончании инкубирования планшеты промывают несколько раз промывочным буфером (wash buffer) для удаления антител захвата, которые не связались с поверхностью микропланшета.

Сорбция антител захвата на поверхности лунки микропланшета

На следующем этапе в лунки микропланшета, поверхность которых покрыта антителами захвата, вносят сок, экстракт, или гомогенат растений, исследуемых на наличие антигенов – патогенных бактерий или вирусов и инкубируют 14-16 часов  при температуре +4°С. При необходимости, растительный материал можно развести экстракционным буфером (extraction buffer). По окончании инкубирования лунки несколько раз промывают промывочным буфером.

При наличии целевого патогена в образце происходит взаимодействие специфичного фрагмента антигена с соответствующим антигенсвязывающим центром антител захвата.

Связывание антигена с антителами захвата

В промытые лунки наносят антитела детекции, конъюгированные с ферментом щелочная фосфатаза (Ф). Антитела разводят в необходимой концентрации в конъюгатном буфере (conugation buffer). Микропланшеты инкубируют при температуре +30°С в течение 5 часов. По окончании инкубирования микропланшеты несколько раз промывают промывочным буфером для удаления антител детекции, не связавшихся с антигенами.

На данном этапе происходит взаимодействие специфичного фрагмента антигена с соответствующим антиегнсвязывающим центром антител детекции. Антигенсвязывающие центры антител захвата и антител детекции различны и специфично связываются с разными фрагментами антигена.

Связывание антител детекции с антигеном

На заключительном этапе в лунки добавляют пара-нитрофенилфосфат, являющийся субстратом для фермента щелочная фосфатаза. При наличии в растительном образце целевых патогенов формируется комплекс антитело захвата-антиген (вирус или бактерия)-антитело детекции, конъюгированное с ферментом щелочная фосфатаза. Фермент (Ф) катализирует превращение бесцветного пара-нитрофенилфосфата (субстрат, С) в жёлтый пара-нитрофенол (продукт, П), в результате чего происходит окрашивание реакционной смеси в жёлтый цвет. Интенсивность окраски  реакционной смеси можно оценивать как визуально, так и с помощью спектрофотометра.

Фермент, конъюгированный с антителами детекции, катализирует реакцию превращения бесцветного субстрата в жёлтый продукт