Все о вакцинах против covid-19

Инактивированные вакцины

Данный вид вакцин имеет самую продолжительную историю применения. Для их изготовления используются своего рода классические технологии. Инактивированная вакцина содержит нежизнеспособные вирусы. Вирусы, которые не могут размножаться. Для формирования длительного иммунного ответа в организме часто требуются повторные введения препарата. Технологическое производство вакцин этого типа не является быстрым в сравнении с производством векторных (субъединичных) вакцин или ДНК- и РНК-вакцин. При их производстве требуется соблюдение особых санитарных норм и требований биологической безопасности.

Вакцина ЭпиВакКорона

ЭпиВакКорона — Эпитопная
Вакцина против Коронавируса,
разработанная ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»
Роспотребнадзора. Это рекомбинантная пептидная вакцина, созданная на новой технологической
платформе. Активным действующим веществом являются 3 пептида — искусственно синтезированные
аналоги небольших участков S-белка коронавируса SARS-CoV-2, которые распознает иммунная система.
После того, как иммунные клетки «познакомились» с белковыми молекулами патогена, запускается
процесс выработки антител к строго определенным участкам Spike-белка.

Вакцину ЭпиВакКорона вводят двукратно, с интервалом в 21 день между инъекциями.

Как оценить эффект после вакцинации ЭпиВакКорона

Новая пептидная технологическая платформа вакцины формирует иммунный ответ
с достаточно узким пулом специфических иммуноглобулинов, которые не выявляются при использовании
стандартных тест-систем для оценки гуморального иммунного ответа. Поэтому для оценки иммунного
ответа после введения пептидной вакцины «ЭпиВакКорона» разработана специальная тест-система, позволяющая
с высокой чувствительностью выявлять специфические антитела к антигенам вакцины.

Эффективность

Вакцины на основе мРНК COVID-19 от Moderna и Pfizer – BioNTech имеют эффективность от 90 до 95 процентов. Предыдущие испытания препаратов мРНК на других патогенах, кроме COVID-19, не были эффективными, и от них пришлось отказаться на ранних этапах испытаний. Причина эффективности новых вакцин с мРНК не ясна.

Врач-ученый Маргарет Лю заявила, что эффективность новых вакцин мРНК COVID-19 может быть обусловлена ​​«огромным объемом ресурсов», которые были вложены в разработку, или что вакцины могут «запускать неспецифический воспалительный ответ на мРНК, который может усиливать свой специфический иммунный ответ, учитывая, что модифицированный нуклеозидный метод уменьшил воспаление, но не устранил его полностью », и что« это также может объяснить интенсивные реакции, такие как боль и лихорадка, о которых сообщалось у некоторых реципиентов мРНК SARS-CoV- 2 вакцины ». Эти реакции, хотя и серьезные, были временными, и, согласно другой точке зрения, они считались реакцией на липидные молекулы, доставляющие лекарство.

Побочные эффекты

Легкие и умеренные побочные эффекты от вакцин считаются вариантом нормы. Вы не должны беспокоиться, если после прививки повысилась температура, появились симптомы простуды или гриппа. В течение нескольких дней такие реакции исчезают самостоятельно.

К самым частым побочным эффектам после вакцинации против нового коронавируса относятся:

• боль в месте инъекции (может болеть все плечо);
• повышение температуры тела;
• гриппоподобные симптомы;
• головная боль;
• боль в мышцах и суставах;
• диарея (понос).

По всем правилам вакцинации после прививки пациент должен оставаться в медицинском учреждении еще 20-30 минут. Это нужно для того чтобы оказать пациенту помощь, если вдруг разовьется аллергическая реакция.

В США, Великобритании и некоторых других странах ведется открытый реестр побочных эффектов от вакцинации. Среди очень редких, но тяжелых последствий отмечают миокардиты (воспаление сердца) и тромбозы (закупорка сосудов тромбами). От российских вакцин подобных эффектов не зарегистрировано. Здесь нужно учесть тот факт, что Россия не ведет открытый реестр побочных эффектов.

Что касается долгосрочных побочных эффектов ковид-вакцин, то информация собирается в режиме реального времени. Спустя почти год после начала масштабных клинических исследований, долгосрочных побочных эффектов пока не установлено.

Эффективность вакцинации

Поствакцинационный иммунитет — иммунитет, который развивается после введения вакцины. Вакцинация не всегда бывает
эффективной. Вакцины теряют свои качества при неправильном хранении. Но даже
если условия хранения соблюдались, всегда существует вероятность, что иммунитет
не простимулируется.

На развитие поствакцинального иммунитета влияют следующие факторы: 1.Зависящие от самой вакцины:
а)
чистота препарата;
б)
время жизни антигена;
в)
доза;
г)
наличие протективных антигенов;
д)
кратность введения.
2. Зависящие от организма:
а)
состояние индивидуальной иммунной реактивности;
б)
возраст;
в)
наличие иммунодефицита;
г)
состояние организма в целом;
д)
генетическая предрасположенность.
3. Зависящие от внешней среды
а)
питание;
б)
условия труда и быта;
в)
климат;
г)
физико-химические факторы среды.

Классификация вакцин

Существуют ли вакцины против других коронавирусов?

SARS-CoV-2 — не первый опасный коронавирус в популяции людей. Семейство коронавирусов включает в себя 43 вида, которые поражают млекопитающих (в том числе людей), птиц и земноводных. Из них семь штаммов поражают организм человека. Впервые коронавирус штамма HCoV-229Е был зарегистрирован в 1965 году среди студентов-медиков в университете Чикаго.

Считалось, что коронавирусы, поражающие человека, за исключением тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV), обнаруженного в ноябре 2002 года в Китае, в основном вызывают легкие инфекции верхних дыхательных путей. По этой причине циркуляция коронавирусов не контролировалась, а разработке вакцин и препаратов против не уделялась такого внимания, как в случае с SARS-CoV-2.

Попытки создать вакцину предпринимались группами китайских и американских ученых. Они считали, что разработка вакцины против SARS-CoV крайне важна, так как эпидемия может повториться в будущем.

В 2012 году также был зарегистрирован коронавирус ближневосточного респираторного синдрома MERS-CoV. Над созданием вакцины от этого вида коронавируса работает Оксфордский университет.

Обсуждение

В данном исследовании был проведен сравнительный анализ образцов эякулята двух исследуемых групп мужчин репродуктивного возраста на уровне экспрессии генов. В исследуемой группе образцы эякулята были получены до вакцинации и через 75 дней после введения второго компонента вакцины, в группе сравнения образцы эякулята были получены с аналогичным временным интервалом. Не было обнаружено статистически значимо дифференциально экспрессирующихся генов в образцах эякулята мужчин группы сравнения. В то же время в результате сравнительного анализа образцов эякулята, полученных до и после вакцинации, было выявлено 13 генов, экспрессия которых достоверно повышена в образцах эякулята, полученных после вакцинации. Согласно базе данных Gene от NCBI и проекту Атлас Протеома Человека (HPA, ) 9 из данных 13 генов экспрессируются исключительно в семенниках: LINC01095, PRSS37, LINC01921, SPATA31D5P, DAB1-AS1, DDX4, MIR7515HG, SORCS3-AS1, FAM186A, а экспрессия генов FAM153A и CEP152 повышена в семенниках и ряде других тканей. Два гена из вышеуказанных кодируют длинные некодирующие РНК (LINC01095, LINC01921), 1 ген — микроРНК (MIR7515HG), 1 — псевдоген (SPATA31D5P), 2 — антисмысловую РНК (DAB1-AS1, SORCS3-AS1), 5 генов являются белок-кодирующими (PRSS37, DDX4, FAM153A, CEP152, FAM186A). Ген CEP152 кодирует центросомный белок , а функция генов FAM153A и FAM186A неизвестна. Ген DDX4 кодирует хеликазу, и ранее было показано, что метилирование данного гена (а, следовательно, и его пониженная экспрессия) остановкой созревания сперматозоидов . Ген PRSS37, в свою очередь, кодирует сериновую протеазу, низкий уровень которой в образце эякулята по данным литературы ассоциирован с идиопатическим мужским бесплодием .

В ранее проведенном исследовании мы выявили, что в образцах эякулята, полученных после перенесенного COVID-19, снижена экспрессия митохондриальных генов и изменен уровень активации сигнальных путей Toll-подобных рецепторов . Это потенциально может приводить к нарушению энергетического обмена в сперматозоидах и снижению их подвижности после перенесенного COVID-19. В данной же работе мы продемонстрировали результаты по повышению экспрессии 13 генов в образцах эякулята, полученных после проведения вакцинации от COVID-19. Интересно отметить, что по данным литературы сниженная экспрессия двух генов из вышеуказанных (DDX4 и PRSS37) ассоциирована с идиопатическим мужским бесплодием.

Векторные (рекомбинантные) вакцины

Вакцины, полученные методами генной инженерии. Суть метода: гены вирулентного  микроорганизма,
отвечающий за синтез протективных антигенов, встраивают в геном какого — либо
безвредного  микроорганизма, который при
культивировании продуцирует и накапливает соответствующий антиген. Примером
может служить рекомбинантная  вакцина  против
вирусного гепатита B,  вакцина  против
ротавирусной инфекции. Наконец, имеются положительные результаты использования
т.н. векторных  вакцин, когда на носитель — живой
рекомбинантный вирус осповакцины (вектор) наносятся поверхностные белки двух
вирусов: гликопротеин D вируса простого герпеса и гемагглютинин вируса гриппа
А. Происходит неограниченная репликация вектора и развивается адекватный
иммунный ответ против вирусной инфекции обоих типов.
Действие отдельных компонентов микробных, вирусных и паразитарных антигенов
проявляется на разных уровнях и в разных звеньях иммунной системы. Их
результирующая может быть лишь одна: клинические признаки заболевания —
выздоровление — ремиссия — рецидив — обострение или другие состояния организма.
Так, в частности, АДС — через 3 недели после ее введения детям приводит к
возрастанию уровня Т-клеток и увеличению содержания ЕКК в периферической крови,
поливалентная бактериальная  вакцина
Lantigen B стимулирует антителообразование Ig A в крови и слюне, но самое
главное, что при дальнейшем наблюдении у вакцинированных отмечено уменьшение
числа случаев заболевания, а если они и возникали, то протекали легче.
Клиническая артина болезни, т.о. является наиболее объективным показателем
вакцинации.
Рекомбинантные
 вакцины  — для производства этих  вакцин  применяют рекомбинантную технологию,
встраивая генетический материал  микроорганизма  
в дрожжевые клетки, продуцирующие антиген. После культивирования дрожжей из них
выделяют нужный антиген, очищают и готовят вакцину.
Примером таких  вакцин  может служить  вакцина против гепатита В (Эувакс В).

Преимущества

Традиционные вакцины

Преимущества и недостатки различных типов вакцинных платформ

РНК-вакцины обладают определенными преимуществами по сравнению с традиционными вакцинами . Поскольку РНК-вакцины не созданы из активного патогена (или даже из инактивированного патогена), они не заразны. Напротив, традиционные вакцины требуют производства патогенов, что, если делать это в больших объемах, может увеличить риски локальных вспышек вируса на производственном объекте. Еще одно биологическое преимущество РНК-вакцин состоит в том, что, поскольку антигены продуцируются внутри клетки, они стимулируют клеточный иммунитет , а также гуморальный иммунитет .

Преимущество производства РНК-вакцин состоит в том, что их можно быстро создать. Moderna разработала свою вакцину мРНК-1273 от COVID-19 за 2 дня. Их также можно производить быстрее, дешевле и более стандартизированным способом (с меньшим количеством ошибок при производстве), что может улучшить реакцию на серьезные вспышки.

Первоначально для массового производства вакцины Pfizer – BioNTech требовалось 110 дней (до того, как компания Pfizer начала оптимизировать производственный процесс до 60 дней), что было значительно быстрее, чем у традиционных вакцин против гриппа и полиомиелита. В рамках этого более длительного периода фактическое время производства составляет всего около 22 дней: две недели для молекулярного клонирования плазмид ДНК и очистки ДНК, четыре дня для транскрипции ДНК в РНК и очистки мРНК и четыре дня для инкапсуляции мРНК в липиде. наночастицы с последующим заполнением и отделкой . Большинство дней, необходимых для каждого производственного цикла, отводится на строгий контроль качества на каждом этапе.

ДНК-вакцины

В дополнение к преимуществам теоретических ДНК-вакцин по сравнению с традиционными вакцинами , РНК-вакцины также обладают дополнительными преимуществами перед ДНК-вакцинами. МРНК будет переведен в цитозоле , так что нет никакой необходимости в РНК , чтобы войти в ядре клетки , и риск быть интегрированы в принимающей геном предотвращен. Модифицированные нуклеозиды (например, псевдоуридины , 2′-O-метилированные нуклеозиды) могут быть включены в мРНК для подавления стимуляции иммунного ответа, чтобы избежать немедленной деградации и обеспечить более стойкий эффект за счет повышенной способности к трансляции. Открытая рамка считывания (ORF) , и нетранслируемые области (UTR) мРНК могут быть оптимизированы для различных целей (этот процесс называется последовательностью мРНК инженерии), например , путем обогащения содержание гуанин-цитозин или выбора конкретных НТО известных для увеличения перевода. Дополнительная ORF, кодирующая механизм репликации , может быть добавлена ​​для усиления трансляции антигена и, следовательно, иммунного ответа, уменьшая необходимое количество исходного материала.

Когда появились вакцины?

Современное понятие вакцинации было введено британским врачом Эдвардом Дженнером в конце 18 века. К 1900 году существовало две человеческие противовирусные вакцины — против оспы и бешенства — и три бактериальные вакцины — против тифа, холеры и чумы. В прошлом веке также были созданы вакцины против коклюша, дифтерии, столбняка, туберкулеза, полиомиелита, краснухи и некоторых других инфекционных заболеваний.

В 1979 году Всемирная ассамблея здравоохранения объявила победу над оспой. Это достижение остается одной из величайших побед общественного здравоохранения в истории.

График ниже показывает уровень смертности от наиболее распространенных инфекционных заболеваний, которые можно предотвратить с помощью вакцинации, в период с 1990 по 2017 годы.

Сверху вниз: туберкулез, корь, коклюш, гепатит В, менингит, вызванный гемофильной инфекцией, столбняк, менингококковый менингит, желтая лихорадка, дифтерия.

Противопоказания

Решение о вакцинации принимается индивидуально, если у пациента есть хронические заболевания печени и почек, сердечно-сосудистой системы, эндокринные нарушения, заболевания ЦНС, аутоиммунные и онкологические заболевания. Иммунная система таких больных ослаблена и разбалансирована. Хотя пока нет клинических исследований о влиянии на организм вакцины для профилактики ковид, теоретически вторжение вакцины может запустить нежелательные процессы.

Вакцину не ставят детям до 18 лет. Возраст – абсолютное противопоказание, также как беременность, период лактации, индивидуальная непереносимость компонентов вакцины и острые инфекционные заболевания. Вакцина предназначена для тех, кто не переболел ковидом. Единственный способ узнать, переболел ли человек – исследование на наличие иммуноглобулинов IgG и IgM.

Перед вакцинацией каждый пациент проходит обязательный осмотр у врача. Обязательным также является измерение температуры тела. Если в течении последних двух недель перед прививкой у пациента наблюдались такие симптомы, как кашель, температура, общее недомогание, то врач назначает ПЦР-тест на ковид.

Когда изобрели векторные вакцины?

Впервые идея создания подобного рода препаратов возникла в 80-х гг. ХХ века. Тогда же и была создана первая векторная вакцина. Гибридные вирусы призваны были в результате внедрения в организм сформировать прочный иммунитет. Достигалось это благодаря возможности вектора синтезировать не только свои белки, но и проективные белки, для защиты от которых нет эффективных вакцин.

фото1

Гибридные вирусы, ставшие результатом лабораторных исследований, начали называть генно-инженерными или векторными. Сами вирусы, геном которых подвергают модификации и в которые устраивают чужеродные гены, называют векторами. В ходе своих работ ученые пришли к выводу, что при создании поливалентных вакцин в качестве вектора лучше использовать вирус.

А почему не КовиВак?

«КовиВак» сделан по самой старой для такого рода препаратов технологии. Это инактивированный («убитый») вирус-возбудитель с добавкой универсального стимулятора иммунитета (адъюванта — гидроокиси алюминия). Нет никаких объективных оснований считать, что «КовиВак» лучше “Спутника”.

Клинические исследования не закончились, и результатов пока нет (пока есть только заявления о 80% эффективности). Что касается исследования безопасности и иммуногенности вакцины, то оно тоже не опубликовано, а в инструкции приводятся примерно такие же противопоказания, что и для «Спутника V». Различие можно заметить только в более низком уровне нежелательных явлений вроде повышения температуры.

Почему фармацевтические компании публикуют пресс-релизы раньше, чем в научных рецензируемых журналах выходят результаты клинических исследований?

Для пресс-релизов нет таких стандартов, которые для научных публикаций. В исследовании необходимо детально описать запланированный дизайн и то, насколько удалось его реализовать, результаты с подробными данными по всем группам участников. Пресс-релиз же может быть каким угодно. Кроме того, чтобы любое исследование попало в научный рецензируемый журнал, оно, как следует из определения, должно пройти рецензию, которая занимает несколько месяцев. Поэтому первая причина, по которой пресс-релизы появляются раньше публикаций в научных журналах, — это просто разные трудозатраты.

Есть, скорее всего, также и финансовая сторона вопроса. 9 ноября — в день, когда Pfizer выпустила пресс-релиз с информацией об эффективности, — акции компании на 15% (акции партнера BioNTech выросли на 25%). В этот же день генеральный директор Pfizer в соответствии с изначальным планом 62% принадлежавших ему акций компании.

Наконец, учитывая хронологию и общественный к вакцинам от COVID-19, нельзя исключать такой вариант, что заявления для СМИ делаются как бы в ответ на заявления конкурента.

Публикация пресс-релиза — это бизнес-составляющая процесса создания вакцины, которая не имеет отношения к науке. Именно поэтому какие-либо выводы стоит делать не раньше, чем для всех интересующих вакцин будут опубликованы результаты третьей фазы клинических исследований.

Векторная вакцина

Огромное преимущество этой вакцины в том, что человеку вводят не сам опасный вирус, как это делалось раньше, а лишь маленький кусочек его генетического кода. Таким образом, вероятность заражения и тяжелых побочных эффектов практически отсутствует.

Генетический код опасного вируса буквально режут на части, извлекая из него маленький фрагмент. Этот фрагмент отвечает за производство поверхностных белков вирусной частицы, которые еще называют «шипами». Вирус использует эти «шипы» как консервный нож для вскрытия человеческой клетки и проникновения внутрь.

Но сам по себе этот фрагмент вирусного гена не может попасть в клетку. Поэтому его доставляют с помощью вектора.

Вектор – это другой вирус, который выполняет роль доставщика. И лучше всего с этой ролью справляется обыкновенный аденовирус, который вызывает простуду.

В процессе изготовления вакцины ДНК аденовируса подвергается двум изменениям:

• Аденовирус лишают функции размножения, что делает его безопасным для человека.
• В ДНК аденовируса встраивают тот самый ген опасного вируса, от которого необходимо привиться.

После введения вакцины аденовирус проникает в клетки человека, высвобождая внутри клеточного ядра свою ДНК. Эта ДНК не может копировать сама себя и вызвать инфекцию. Вместо этого она превращает клетку в нано-фабрику по производству шипов опасного вируса.

Важно!

Произведенные вирусные шипы выступают на поверхности клетки, а наш иммунитет, распознав в них чужеродный элемент, немедленно блокирует зараженную клетку и вырабатывает антитела к незнакомому белку.

Может ли аденовирусный вектор повредить ДНК человека?

По сути, аденовирусный вектор мало чем отличается от обычного аденовируса, которым в течение жизни заражаются практически все люди на Земле. А манипуляции с ДНК принципиально не меняют его поведение.

По словам Линды Кофлан, исследователя векторных вакцин из Университета Мэрилэнда, аденовирус не имеет ферментативного механизма для присоединения к человеческой ДНК. Дело в том, что две молекулы ДНК не могут объединиться сами по себе, без специального фермента. Аденовирус не обладает таким ферментом и полностью безопасен для генома человека. Именно этим обстоятельством руководствовались разработчики вакцины, выбрав аденовирус в качестве «доставщика».

А учитывая, что вектор лишен способности размножаться, в момент гибели зараженной клетки ДНК вектора поглощается и расщепляется нашими иммунными клетками. Вакцина исчезает без следа, а человек приобретает иммунитет к опасному вирусу, с которым может столкнуться в будущем.

Грегори Поланд, доктор медицинских наук из клиники Мэйо, обратил внимание на то, что изготовители вакцин всегда используют специальные культуры аденовирусов, которые классифицируются как неинтегрирующиеся. Это значит, что безопасность данных векторов для ДНК человека и животных была доказана многократными исследованиями

Интересный факт!

Побочные эффекты вакцины «Спутник-V»

Официальные источники, опубликованные в этом году, выявили 7485 случаев легких побочных эффектов от данной вакцины, что составило 94% от всех, кто принимал участие в исследовании. Побочные эффекты средней тяжести зафиксированы у 451 человека – это 5%. Тяжело перенесли вакцинацию 30 человек – это 4%. Смертельных последствий от вакцины зафиксировано не было.

Один из неофициальных источников, где публикуются данные о перенесении вакцинации населением – «Телеграм». Здесь есть чат «Народные отчеты о вакцинации». Перенесшие прививку люди, описывают следующие состояния – температура, боль в месте введения, сонливость и слабость.

Напомним, что на сегодняшний день, вакцина – единственный способ избежать заболевания, если Вы еще им не переболели, или перенести его в легкой форме. Если привитый человек заболеет, вероятность тяжелого течения заболевания будет сведена к нулю, считают ученые.

Векторные вакцины – преимущества и недостатки

Все создаваемые лекарственные препараты, кроме явных плюсов имеют и свои недостатки. Основным преимуществом векторных вакцин является высокая иммуногенность. Это означает, что после введения иммунный ответ возникает у каждого привитого пациента. Об этом свидетельствует высокий титр антител в сыворотке крови.

Однако это преимущество можно рассматривать одновременно и как минус. Главные недостатки векторных вакцин специалисты связывают с малой их изученностью. Препараты раннее не были изучены на большой популяции. В результате врачи не могут говорить о длительных перспективах и продолжительности иммунитета, который формируется в результате вакцинации препаратами на основе векторов. Данные минусы векторных вакцин зачастую становятся препятствием для их массового производства.

Источники

1. Минздрав России зарегистрировал первую в мире вакцину от COVID-19. Министерство здравоохранения Российской Федерации (11.08.2020). Дата обращения: 11 августа 2020. Архивировано 12 августа 2020 года.
2. Logunov D. Y. et al. Safety and efficacy of an rAd26 and rAd5 vector-based heterologous prime-boost COVID-19 vaccine: an interim analysis of a randomised controlled phase 3 trial in Russia (англ.) // The Lancet. — 2021. — 2 February. — ISSN 0140-6736. — doi:10.1016/S0140-6736(21)00234-8
3. Регистрационное удостоверение и Инструкция по медицинскому применению лекарственного препарата «ЭпиВакКорона вакцина на основе пептидных антигенов для профилактики COVID-19» от 13.10.2020 г. + Изменение № 1 от 13.01.2021 г. + Изменение № 2 от 10.02.2021 г. + Изменение № 3 от 03.03.2021 г. // Электронные образы документов на сайте «Государственный реестр лекарственных средств».
4. Clinical trial number NCT04368728 for «NCT04368728: Study to Describe the Safety, Tolerability, Immunogenicity, and Efficacy of RNA Vaccine Candidates Against COVID-19 in Healthy Individuals» at ClinicalTrials.gov
5. University of Oxford. A Phase 2/3 Study to Determine the Efficacy, Safety and Immunogenicity of the Candidate Coronavirus Disease (COVID-19) Vaccine ChAdOx1 nCoV-19. — clinicaltrials.gov, 2020-12-08. — № NCT04400838.
6. Tanriover MD, Doğanay HL, Akova M, Güner HR, Azap A, Akhan S, Köse Ş, Erdinç FŞ, Akalın EH, Tabak ÖF, Pullukçu H, Batum Ö, Şimşek Yavuz S, Turhan Ö, Yıldırmak MT, Köksal İ, Taşova Y, Korten V, Yılmaz G, Çelen MK, Altın S, Çelik İ, Bayındır Y, Karaoğlan İ, Yılmaz A, Özkul A, Gür H, Unal S; CoronaVac Study Group. Efficacy and safety of an inactivated whole-virion SARS-CoV-2 vaccine (CoronaVac): interim results of a double-blind, randomised, placebo-controlled, phase 3 trial in Turkey. Lancet. 2021 Jul 17;398(10296):213-222. doi: 10.1016/S0140-6736(21)01429-X. Epub 2021 Jul 8. PMID: 34246358; PMCID: PMC8266301.

Какие испытания прошла вакцина от коронавируса?

Сразу после синтеза нового препарата, ученые провели доклиническое тестирование на хомячках и приматах. Проверяли токсичность, безопасность и эффективность новой вакцины. Никаких осложнений, побочных реакций у животных не возникло, поэтому ученые приступили к  клиническим испытаниям на людях.

Первая фаза испытаний обычно проводится на небольшой группе здоровых добровольцев. Для тестирования российской вакцины «Спутник V»   было привлечено 76 военных возрастом от 18 до 60 лет. Фаза была разделена на два этапа.

Первый этап длился 28 дней. Девятнадцати добровольцам поставили первую часть вакцины, основанной на ослабленном аденовирусе 26 типа, другим девятнадцати – вторую, с аденовирусом 5 типа. Так была проверена безопасность обоих компонентов вакцины. Результатом этапа стала хорошая переносимость препарата всеми добровольцами. Побочные эффекты были легкими или умеренными:

• боль в месте инъекции (58%);
• повышение температуры (50%);
• головная боль (42%);
• слабость (28)%;
• боль в мышцах и суставах (24%);

Опасных для жизни побочных эффектов обнаружено не было.

Во время второго этапа исследовался уже формирующийся после вакцинации иммунитет. Все добровольцы получили обе части вакцины с разницей в 21 день между ними. На 28 день после введения второй дозы, с помощью высокоточных тестов, у 100% добровольцев были обнаружены антитела к SARS-CoV-2. Более того, было доказано формирование другого – клеточного  иммунитета. Обычно он сохраняется в «памяти» организма несколько лет.

Спустя три месяца после старта третьей фазы клинических испытаний в декабре 2020 г. российский Минздрав принял решение совместить последний этап исследований с массовой вакцинацией населения прививкой «Спутник V».  Решение приняли оперативно, основываясь на предварительных результатах, опубликованных разработчиками вакцины в ноябре 2020 г.

В основе проведенных расчетов лежат случаи заболевания COVID-19 среди уже привитых добровольцев. Из общего числа участников испытаний, получивших обе положенные инъекции вакцины или плацебо (18 794), к концу третьей недели после второго укола вирус был диагностирован у 39 человек.

31 случай заражения был выявлен у тех, кто получил плацебо. В группе волонтеров, привитых настоящей вакциной, COVID-19 был диагностирован у восьмерых (группа получивших вакцину – в три раза больше группы плацебо). Сопоставление результатов по двум группам дает результат эффективности вакцины в 95%.

«Набранная группа участников исследований позволяет в полной мере исследовать профиль безопасности и профилактической эффективности вакцины на длительном промежутке времени», – пояснили  в Минздраве.

Несмотря на то, что прививка «Спутник V» стала доступна всем желающим (за исключением группы с противопоказаниями), ученые продолжили наблюдение за добровольцами, принявшими участие в третьей фазе клинических испытаний. Второго февраля 2021г. разработчики вакцины представили результаты исследования в авторитетном медицинском издании The Lancet.

Материал и методы

Настоящее исследование было проведено на базе Городской клинической больницы №15 им. О.М. Филатова. В исследование были включены 10 мужчин в возрасте от 18 до 50 лет.

Для оценки влияния вакцины «Гам-КОВИД-Вак» («Спутник V») на мужскую фертильность было проведено комплексное обследование, включающее анализ показателей спермограммы (параметры концентрации, подвижности, морфологии сперматозоидов; MAR-тест), клинического и биохимического анализов крови, оценка параметров гормонального профиля (общий тестостерон, эстрадиол, ФСГ, ЛГ, пролактин), выявление сопутствующих урологических заболеваний (сбор анамнеза, физикального обследования наружных половых органов и простаты). Результаты данного этапа исследования были опубликованы ранее .

Исследуемую группу составили 6 мужчин, планирующие проведение вакцинации от COVID-19 векторной вакциной «Гам-КОВИД-Вак» («Спутник-V») Национального исследовательского центра эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи. В группу сравнения были включены четверо мужчин, не заинтересованных в вакцинации от COVID-19.

Все пациенты, включенные в исследование, были четко инструктированы о сборе образцов эякулята в стерильный контейнер после не менее 48 часового и не более 5-7-дневного воздержания. Образцы эякулята пациентов исследуемой группы были получены до вакцинации и через 75 дней после введения второго компонента вакцины «Гам-КОВИД-Вак». Образцы эякулята пациентов группы сравнения были получены с аналогичным временным интервалом.

Выделение и секвенирование РНК

Выделение РНК из образцов эякулята проводилось с помощью универсального набора QIAGEN RNeasy Plus Universal Mini Kit в соответствии с протоколом производителя. Для измерения концентрации РНК использовали наборы RNA 6000 Nano и Qubit RNA Assay. Число целостности РНК (RIN) измеряли с помощью биоанализатора Agilent 2100. Для деплеции рибосомальной РНК и конструирования библиотек использовали набор KAPA RNA Hyper. Для мультиплексирования образцов в одном цикле секвенирования использовались разные адаптеры. Концентрация и качество библиотеки измерялись с помощью набора Qubit ds DNA HS Assay (Life Technologies) и Agilent TapeStation. Секвенирование РНК было выполнено с использованием оборудования Illumina NextSeq 550 в режиме одноконцевого прочтения, длина прочтения 75 п.н., получено примерно 30 миллионов сырых прочтений на образец. Демультиплексирование проводили с помощью программы Illumina Bcl2fastq2 v 2.17.

Биоинформатический анализ

Файлы FASTQ, полученные после секвенирования РНК, были обработаны с помощью программного обеспечения STAR в режиме GeneCounts с аннотацией транскриптома человека от Ensembl (версия сборки генома GRCh38 и аннотация транскриптов GRCh38.89). Идентификаторы генов Ensembl были преобразованы в символы генов HGNC с использованием полного набора данных HGNC (; версия базы данных от 13 июля 2017 г.). Уровни экспрессии были установлены для 36 596 аннотированных генов с соответствующими идентификаторами HGNC. Минимальное количество однозначно картированных прочтений составило 3,41 млн для исследуемых биопроб при среднем значении 15,95 млн. Анализ дифференциальной экспрессии генов выполняли с использованием программного обеспечения DESeq2 со следующими пороговыми значениями: скорректированное р-значение FDR <0,05 и | log2 (кратности изменения) | > 1. Дифференциальные гены визуализированы с помощью R пакета EnhancedVolcano.

Заключение

Сравнительный анализ образцов эякулята, полученных до вакцинации против COVID-19 векторной вакциной «Гам-КОВИД-Вак» («Спутник-V») и через 75 дней после введения второго компонента вакцины не выявил статистически значимых изменений в функционировании внутриклеточных молекулярных путей. Полученные данные позволяют предположить отсутствие негативного воздействия указанной вакцины на молекулярно-генетические характеристики сперматозоидов у мужчин репродуктивного возраста.

Для формирования финальных выводов об отдаленных последствиях вакцинации против COVID-19 на репродуктивное здоровье мужчин необходимо проведение дальнейших масштабных клинических исследований. Но полученные на данный момент результаты подтверждают безопасность вакцины «Гам-КОВИД-Вак» («Спутник-V») и подчеркивают необходимость вакцинации, которая остается единственным эффективным методом профилактики новой коронавирусной инфекции COVID-19. Таким образом, следует рекомендовать вакцинацию против COVID-19 мужчинам репродуктивного возраста для нивелирования вероятности неблагоприятных последствий инфекции, включающих ухудшение параметров эякулята, и в целом влияния COVID-19 на наступление и течение беременности.